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2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix

2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix

Cat No.

size

CM0017-01

1ml

CM0017-02

5ml

CM0017-03

50ml

【产品名称】

产品名称:2X SYBR Green 实时荧光一步法 RT-PCR 反应液

英文名称:2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix

【产品用途】

 SYBR Green染料,用于实时定量荧光 RT-PCR。

【产品简介】

本产品是一种使用 SYBR® Green 染料通过一步法对 RNA 进行定量检测的预混液,通过优化预混液配比保证其特异性、稳定性和可靠性。 RT-PCR将单链 RNA 模板逆转录并扩增反应得到双链 DNA,一步法 RT-PCR 采用基因特异性引物,通过一步法单管的方式获得 RNA/cDNA 靶标。这种方法便于在多个 RNA 样本中对单靶基因进行分析,同时,也最大限度减少了逆转录和 PCR 扩增反应之间的污染,因为逆转录过程和 PCR扩增两个步骤连续进行,无需打开反应管/板。

【主要成份】

SYBR Green 染料、Hot-start Taq DNA Polymerase、Reverse Transcriptase dNTPs、Mg2+和 PCR buffer 组成。

【储存条件及有效期】

-20℃以下可以保存一年,防止反复冻融导致酶活降低,使用时可分装成小管。

【产品稳定性】

一管便捷式 2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix 系列所有产品在-20℃条件下可保存一年以上,多次冻融或长期放于 4℃不影响活性。4℃放置三个月,无明显活性改变。

【产品使用方法】

1.反应前将 2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix、模板 RNA和引物室温解冻。解冻后需轻微振荡混匀,简短离心。

2.RT-PCR反应液配制(以 20uL RT-PCR体系为例)在冰上将以下各成分加入 PCR反应管:

 

成分

体积

2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix

10uL

10X Primer Mix

2uL

模板 RNA

2uL*

ddH2O

6uL

总体积

20uL

*注:如果RNA加样体积大于2uL时,相应减少ddH2O 体积

3.手指轻弹 PCR 反应管充分混匀,简短离心。

4.然后置于 PCR 反应仪上进行 RT-PCR 反应。

5.RT-PCR反应条件

 

温度

时间

循环数

50℃

10min

Hold

95℃

1min

Hold

95℃

15s

40 cycles

60℃

1min

【注意事项】

1.所有相关耗材请使用一次性的,以防止污染和沾染。

2.实验人员必须进行专业培训,严格按照说明书操作,按照实验过程严格区分进行(试剂准备区、标本制备区、扩增和产物分析区),实验操作的每个阶段使用专用的仪器和设备,各区各阶段用品不能交叉使用。

3.按要求进行防护措施,如手套、工作服、废弃物等处理需要符合国家相关规定。

4.请在有效期内使用本试剂盒。


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