2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix
Cat No. | size |
CM0017-01 | 1ml |
CM0017-02 | 5ml |
CM0017-03 | 50ml |
【产品名称】
产品名称:2X SYBR Green 实时荧光一步法 RT-PCR 反应液
英文名称:2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix
【产品用途】
含 SYBR Green染料,用于实时定量荧光 RT-PCR。
【产品简介】
本产品是一种使用 SYBR® Green 染料通过一步法对 RNA 进行定量检测的预混液,通过优化预混液配比保证其特异性、稳定性和可靠性。 RT-PCR将单链 RNA 模板逆转录并扩增反应得到双链 DNA,一步法 RT-PCR 采用基因特异性引物,通过一步法单管的方式获得 RNA/cDNA 靶标。这种方法便于在多个 RNA 样本中对单靶基因进行分析,同时,也最大限度减少了逆转录和 PCR 扩增反应之间的污染,因为逆转录过程和 PCR扩增两个步骤连续进行,无需打开反应管/板。
【主要成份】
SYBR Green 染料、Hot-start Taq DNA Polymerase、Reverse Transcriptase 、dNTPs、Mg2+和 PCR buffer 组成。
【储存条件及有效期】
-20℃以下可以保存一年,防止反复冻融导致酶活降低,使用时可分装成小管。
【产品稳定性】
一管便捷式 2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix 系列所有产品在-20℃条件下可保存一年以上,多次冻融或长期放于 4℃不影响活性。4℃放置三个月,无明显活性改变。
【产品使用方法】
1.反应前将 2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix、模板 RNA和引物室温解冻。解冻后需轻微振荡混匀,简短离心。
2.RT-PCR反应液配制(以 20uL RT-PCR体系为例)在冰上将以下各成分加入 PCR反应管:
成分 | 体积 |
2X SYBR Green Real-Time One-Step RT-PCR Master Mix | 10uL |
10X Primer Mix | 2uL |
模板 RNA | 2uL* |
ddH2O | 6uL |
总体积 | 20uL |
*注:如果RNA加样体积大于2uL时,相应减少ddH2O 体积
3.手指轻弹 PCR 反应管充分混匀,简短离心。
4.然后置于 PCR 反应仪上进行 RT-PCR 反应。
5.RT-PCR反应条件
温度 | 时间 | 循环数 |
50℃ | 10min | Hold |
95℃ | 1min | Hold |
95℃ | 15s | 40 cycles |
60℃ | 1min |
【注意事项】
1.所有相关耗材请使用一次性的,以防止污染和沾染。
2.实验人员必须进行专业培训,严格按照说明书操作,按照实验过程严格区分进行(试剂准备区、标本制备区、扩增和产物分析区),实验操作的每个阶段使用专用的仪器和设备,各区各阶段用品不能交叉使用。
3.按要求进行防护措施,如手套、工作服、废弃物等处理需要符合国家相关规定。
4.请在有效期内使用本试剂盒。