AAV 滴度定量
AAV (腺相关病毒)是一种常见的病毒载体,其在生物制药方向的应用非常广泛,包括基因治疗、疫苗开发、基因传递、基因编辑和基因表达调控等。它具有许多优点,如高效的基因传递能力、较低的免疫反应和良好的安全性。然而,在这些应用中,AAV 载体生产面临诸多挑战。在AAV 以各种低滴度浓度进行批量生产时,需要通过浓缩和定量来满足剂量递增研究所需的优化浓度。为此,在AAV 制造过程的多个步骤中实现准确和可再现定量的重要性日益突显。数字PCR(Digital PCR)是一种用于核酸定量的分子生物学技术。它可以实现不依赖标准品的绝对定量,而不仅仅是相对定量。
VCN 检测
在细胞治疗产品中,CAR 细胞拷贝数对于治疗效果至关重要。通过设计靶标基因和内参基因,并使用数字PCR(ddPCR) 技术 的方法来进行绝对定量,能够避免标准曲线校准不佳及扩增效率差的影响。该方法可以准确测量CAR 细胞的拷贝数,结果准 确度高,重复性好。
用药疗效监测
CAR-T用药后疗效监测的目的是要弄清楚目标细胞在体内增殖、分布和存续时间。数PCR 提供了极度精确的拷贝数,能够更好的对CAR-T细胞在体内的数量进行监测。在进行细胞治疗过程中回输患者体内的CAR-T细胞的持久性和增殖会直接影响临床疗效,因此在临床试验和最终患者治疗过程中都需要对回输后的CAR-T细胞数量进行监控,来评估治疗效果,患者外周血中CAR 基因的拷贝数可以对CAR-T细胞的数量进行有效评估。
iPSC 残留超敏检测
iPSC特异性的mRNA 靶点通过多结果合并分析,可以实现iPCS超敏检测,灵敏度可达1/数百万细胞。