CAMO 360 Master Mix 是一款热启动 PCR 扩增试剂产品,可用作各种DNA模板的制备。本Master Mix 包含所有进行PCR反应的组份,同时外加一支增强剂,必要时可用于困难模板的扩增。360 Master Mix具有以下特点:
• 热启动PCR降低引物二聚物和非特异性产物的生成
• 适用于<3 Kb 的各种范围的DNA扩增
• 无与伦比的灵敏度、特异性和高收率
• 增强剂对富含GC 的DNA模板序列具有强力扩增作用
• 提供高质量的DNA测序数据
• 本试剂是配制好的预混液,操作简单快捷,只需将扩增模板和引物加入即可
【主要成份】
试剂盒型号 | CM0241-01 | CM0241-02 | CM0241-03 |
2X 360 Master Mix | 1mL | 5mL | 50mL |
10X 360 Enhancer | 1mL | 1mL | 10mL |
【储存条件及有效期】
-20℃以下可以保存一年。
【产品使用方法】
1. 反应前将2X 360 Master Mix 、10X 360 Enhancer和引物室温解冻。解冻后需轻微振荡混匀,简短离心。
2. 按下表试剂顺序配制PCR反应液,以1个样本为例:
成分 | 体积, uL | 体积, uL |
2X 360 Master Mix | 12.5 | 25 |
10X 360 Enhancer | 0.5-5* | 1- 10* |
5X PCR 引物 | 5 | 10 |
DNA | x | x |
H2O | 补齐 25 | 补齐 50 |
总体积 | 25 | 50 |
* 对于GC含量为65 - 75%的样本,25µL体系时用10X 360 Enhancer 2.5µL, 50µL体系时用10X 360 Enhancer 5.0µL。对于>75% GC的样本,25µL体系时用10X 360 Enhancer 5µL, 50µL体系时用10X 360 Enhancer 10µL,
PCR 扩增条件:
温度 | 时间 | 循环数 |
95℃ | 10min | |
95℃ | 15-30s* |
25-40 cycles |
55-60℃# | 30s | |
72℃ | 60s | |
72℃ | 7min | |
4℃ | ∞ |
* 对于> 2kb 的扩增子,变性 15 秒。对于≤2kb 的扩增子,变性30s。
# 推荐使用 Tm >55℃的引物。
【注意事项】
1 .所有相关耗材请使用一次性的,以防止污染和沾染。
2 .实验人员必须进行专业培训,严格按照说明书操作,按照实验过程严格区分进行(试剂准备区、标本制备区、扩增和产物分析 区),实验操作的每个阶段使用专用的仪器和设备,各区各阶段用品不能交叉使用。
3 .按要求进行防护措施,如手套、工作服、废弃物等处理需要符合国家相关规定。
4 .请在有效期内使用本试剂盒。