染色质免疫共沉淀ChIP是研究体内DNA与蛋白质结合的技术。先用甲醛交联细胞内的“蛋白-DNA”复合物,裂解细胞后,用超声波破碎DNA至适合的长度,采用特异性抗体beads捕获细胞内的“诱饵蛋白-结合DNA” 复合体,随后将蛋白与DNA解交联,提取结合的DNA。该DNA可用于后续的定量PCR检测(qPCR)或高通量测序(seq)。
根据诱饵蛋白是否携带标签,以及beads类型不同,对应多款ChIP试剂盒,可用于在不同情况下调取目标蛋白及其结合的DNA片段。
当诱饵蛋白不带标签时,可以根据beads的不同选择protein G 或Protein A/G ChIP试剂盒,当诱饵蛋白携带标签时,可以根据标签种类的不同选择flag 系列试剂盒,该系列试剂盒采用了优化并重组表达的、无轻重链的标签抗体磁珠进行ChIP实验。IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱,均不会出现抗体的轻、重链污染问题。