CM0021-02 | SYBR Green Real-Time Master Mix | 5*1ml |
本产品提供了单管形式基于SYBR Green染料的PCR扩增及检测中所需的一切成分,是一种预混体系,浓度为2X SYBR Green 染料可检测双链DNA,无需添加特定的探针;热启动DNA聚合酶可减少非特异性产物的形成;专用的缓冲液增强剂确保性能和可靠性。
【产品使用方法】
1.反应前将2X SYBR Green Real-Time PCR Master Mix 、 模板DNA 和引物室温解冻。解冻后轻微上下颠倒混匀。
2.PCR 反应液配制(以20uL PCR 体系为例),按以下成分比例 加入PCR 反应管:
成分 | 体积 |
2X SYBR Green Real-Time PCR Master Mix | 10uL |
正向引物(10uM) | 0.4uL* |
反向引物(10uM) | 0.4uL* |
dna模版 | X uL(100-200ng) |
无核酸酶水 | to 20uL |
3.手指轻弹 PCR 反应管充分混匀,简短离心。
4.然后置于 PCR 反应仪上进行 PCR 反应。
5.PCR 反应条件
两步法(高特异性):
温度 | 时间 | 循环数 |
95℃ | 30s | |
95℃ | 10s |
40 cycles |
60℃ | 30s |
三步法(高扩增效率):
温度 | 时间 | 循环数 |
95℃ | 30s | |
95℃ | 10s |
40 cycles |
55-65℃ | 10s | |
72℃ | 30s |