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SYBR Green Real-Time PCR Master


CM0021-02SYBR Green Real-Time Master Mix5*1ml


本产品提供了单管形式基于SYBR Green染料的PCR扩增及检测中所需的一切成分,是一种预混体系,浓度为2X SYBR Green 染料可检测双链DNA,无需添加特定的探针;热启动DNA聚合酶可减少非特异性产物的形成;专用的缓冲液增强剂确保性能和可靠性。


【产品使用方法】 

1.反应前将2X SYBR Green Real-Time PCR Master Mix 、 模板DNA 和引物室温解冻。解冻后轻微上下颠倒混匀。

2.PCR 反应液配制(以20uL PCR 体系为例),按以下成分比例 加入PCR 反应管:

 

成分体积
2X SYBR Green Real-Time PCR Master Mix10uL
正向引物(10uM)0.4uL*
反向引物(10uM)0.4uL*
dna模版X uL(100-200ng)
无核酸酶水to 20uL
 *注:推荐模板加样量为1-2ul,如果模板类型为未稀释cDNA原液,模板添加量不应超过总反应体系的10%。必要时可以对模板进行梯度稀释,以确定最加添加量。 

3.手指轻弹 PCR 反应管充分混匀,简短离心。 

4.然后置于 PCR 反应仪上进行 PCR 反应。 

5.PCR 反应条件 

                       两步法(高特异性):

温度

时间

循环数

95℃

30s


95℃

10s

 

40 cycles

60℃

30s



                                        三步法(高扩增效率)

温度

时间

循环数

95℃

30s


    95℃             10s

 

40 cycles

        55-65℃

10s

72℃

30s


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