简 介

 Xpure磁珠为DNA产物，酶促反应的DNA片段选择性回收纯化提供一条快速的解决方案。试剂盒采用均一的弱离子交换磁珠纯化技术，适合于从DNA产物、限制性内切酶切体系、或其它酶促反应液中选择回收100bp-20Kbp DNA片段，xpure磁珠采用独特的结合条件，可通过加入不同的体积Xpure，选择性回收不同的片段，特别适合引物二聚体严重的DNA产物，或为第二代测序准备DNA文库。

保 存 条 件

xpure磁珠室温运输。收到该试剂后请于2-8^oC保存。该试剂可以在2-8ºC保存6个月。

准 备 工 作

l 70%乙醇

l 磁力架

操 作 流 程

A. 两步法纯化流程(回收中间片段)

1. 转移PCR产物或酶促反应液至1.5ml离心管中。

2. 去除大片段DNA：加入X ul (0.5~1.0倍) xpure磁珠至DNA产物中。移液枪吸打混匀10次，室温静置3分钟。

由于 xpure磁珠加入的体积对片段选择极为敏感，建议进行样品实验前，先用100bp DNA Marker进行较准实验，以减少不同移液枪的误差。

3. 把样品转移至磁力架上，静置10分钟富集磁珠。

4. 小心转移上清液至新的离心管中(含小片段DNA)。加入(1.2~1.8)倍起始产物体积-Xul至上清液，吸打混匀10次，室温静置3分钟。

例：若PCR产物体积为50µl，若第一次加入25µl xpure磁珠，第二次则可加入(60~90µl)-25µl =35~65µl的xpure磁珠。若第一次加入50µl，则第二次可加入(60~90µl)-50µl =10~30µl。

5. 把样品转移至磁力架上，静置10分钟富集磁珠。小心吸弃上清液。

6. 每孔加500µl 70%乙醇。静置30秒。小心吸弃上清液。

7. 每孔再加500µl 70%乙醇。静置30秒。小心吸弃上清液。空气干燥5~10分钟。

8. 从磁力架上取下样品，加入10~40µl Buffer TE或2Mm Tris-HAc,pH8.0，或灭菌水(pH7.0-8.0)至每一个孔中。吸打10次，或涡旋重悬磁珠。室温静置1分钟。

9. 转移至磁力架上静置5~10分钟富集磁珠，把DNA转移至新的离心管中。

B. 一步法纯化流程(普通产物回收)

1. 转移PCR产物或酶促反应液至1.5ml离心管中。

2. 加入1.0~1.8倍体积的xpure磁珠至样品中，吸打混匀10次，室温静置3分钟。

3. 把样品转移至磁力架上，静置10分钟富集磁珠。小心吸弃上清液。

4. 每孔加500µl 70%乙醇。静置30秒。小心吸弃上清液。

5. 每孔再加500µl 70%乙醇。静置30秒。小心吸弃上清液。空气干燥5~10分钟。

6. 从磁力架上取下样品，加入10~40µl Buffer TE或2Mm Tris-HAc,pH8.0，或灭菌水(pH7.0-8.0)至每一个孔中。吸打10次或涡旋重悬磁珠。室温静置1分钟。

7. 转移至磁力架上静置5~10分钟富集磁珠。把DNA转移至新的离心管中。